Techniki chromatograficzne
- Technika Powinowactwa:
1) Kowalencyjne przyłączenie gr X (np. glukoza)
2) Nałożenie mieszaniny białek na kolumnę
3) Przemycie buforem (usuwa białka niezwiązane)
Przykład: Konkanawalina - białko roślinne wiąże się z glukozą (w większości inne proteiny nie wykazują powinowactwa do glukozy i przepływają przez kolumnę)
Konkanawalina uwalniana jest z kolumny przemyciem jej stężonym roztworem glukozy.
- Technika Jonowymienna
wykorzystuje powinowactwo białek wobec złoża (jego wypadkowy ładunek
elektryczny jest inny dla każdego białka).
Kolumny:
Dodatnio naładowane złoże
(DEAE-celuloza) wyłapuje białka obdarzone „-„
Ujemnie naładowane złoże
(CM-celuloza) wyłapuje białka „+”
- Filtracja żelowa
kolumny z Sephadex, Sepharose. Małe białka wnikają do środka ziaren złoża i zatrzymują się na kolumnie, natomiast duże proteiny przepływają.
Komentarze
Prześlij komentarz
Zapraszamy do komentowania, każdą uwagą warto się podzielić